在生物医疗领域，分离和纯化蛋白质是研究和应用的重要步骤。以下是几种常见的蛋白质分离纯化的方法及其原理。

一、利用分子大小

1. 透析：将待提纯的蛋白质放入透析袋中，浸泡在蒸馏水中。其原理在于利用蛋白质分子无法穿透半透膜的特性，从而将其与其他小分子，如无机盐、单糖和水等分开。

2. 超滤：采用压力和离心力，强制小分子和水通过半透膜，同时将蛋白质留在膜上。这种方法适用于大规模的蛋白质分离。

3. 凝胶过滤层析：当不同分子大小的蛋白质混合物进入凝胶层析柱时，大于凝胶网孔的分子无法进入珠内的网状结构，它们被排阻在凝胶珠外部，而小于孔的分子则可以部分进入凝胶珠。因此，不同大小的分子经历不同的路径，从而实现分离。

二、利用溶解度差别

4. 等电点沉淀：由于各类蛋白质具有不同的等电点，当蛋白质混合物的pH调至特定蛋白质的等电点时，该蛋白质将大部分沉淀。

5. 盐析与盐溶解：在低盐浓度下，中性盐可提高蛋白质的溶解度，此现象称为盐溶。当离子强度增大到足够水平，比如饱和或半饱和状态时，许多蛋白质会从水中沉淀，称为盐析。

三、根据电荷不同

6. SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）：通过加热和SDS处理，可使蛋白质变性，从而将多亚基蛋白解离为单亚基。经过处理的样品中，肽链处于无二硫键的分离状态。电泳时，SDS-蛋白质复合物在凝胶中的迁移率主要取决于蛋白质的分子量，而不是其原有的电荷和形状。因此，SDS-PAGE常用于分析蛋白质的纯度和大致测定蛋白质的分子量。

7. 离子交换层析：通常使用阳离子交换树脂进行氨基酸的分离。树脂处理成钠型后，混合氨基酸在柱中主要以阳离子形式存在，与钠离子进行交换并吸附在树脂上。

上述方法在生物医疗领域的应用，尤其是在药物开发、疾病研究和治疗中，发挥着至关重要的作用。892博天娱乐官网致力于为生物医学研究提供优质的分离和纯化解决方案，帮助科研工作者提高实验效率与准确性。