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NEWS人Renalase(RNLS)检测说明书 - 918博天娱乐官网
来源:孟磊亨 日期:2025-03-10本试剂盒仅供科学研究用途,不得用于医学诊断。Renalase (RNLS) Elisa 试剂盒的使用说明如下:
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品和 HRP 标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后,加入底物 TMB 进行显色反应。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,并在酸性条件下最终变为黄色。样本中adropin(AD)浓度的变化与颜色深浅呈正相关。最后,使用酶标仪在 450nm 波长下测定样品的吸光度(OD值),从而计算出样本浓度。
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免在操作过程中刺激细胞。血液收集后进行 3000 转/分钟离心 10 分钟,快速、谨慎地分离出血清和红细胞。
2. 血浆:使用 EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。以 3000 转/分钟离心 30 分钟后取上清。
3. 细胞上清液:进行 3000 转/分钟离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,然后以 3000 转/分钟离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如未能及时检测样品,请分装为一次用量并存放于 -20℃,避免反复冻融,解冻时需在室温下完全解冻并确保均匀。
请确保所需的材料和设备齐全,以保证实验的顺利进行。
标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
20×洗涤缓冲液需以蒸馏水按 1:20 稀释,即混合 1 份 20×洗涤缓冲液与 19 份蒸馏水。
遵循标准的洗板操作步骤,确保每一步执行到位,以提高实验准确性。
在 Excel 工作表中,以标准品浓度作为横坐标,对应的 OD 值作为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线。根据曲线方程计算各样本的浓度值。
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